Halo Sobat TeknoBgt! Apakah kamu sedang bingung cara menghitung MPN? Jangan khawatir, dalam artikel kali ini, kita akan membahas langkah-langkah menghitung MPN dengan mudah dan jelas. Mari kita mulai!
Apa itu MPN?
MPN adalah singkatan dari Most Probable Number atau jumlah paling mungkin. MPN digunakan untuk menghitung jumlah bakteri atau mikroorganisme lain dalam sampel. MPN sering digunakan dalam pengujian keamanan pangan dan lingkungan.
Apa yang Diperlukan untuk Menghitung MPN?
Untuk menghitung MPN, kamu memerlukan alat dan bahan berikut:
Alat dan Bahan | Fungsi |
---|---|
Tabung Durham | Untuk menangkap gas yang dihasilkan oleh bakteri |
Larutan seri 10 | Untuk mengencerkan sampel |
Larutan seri 2 | Untuk memperkecil konsentrasi sampel |
Media pertumbuhan | Untuk mendukung pertumbuhan bakteri |
Pipet | Untuk mengukur volume sampel |
Inkubator | Untuk menumbuhkan bakteri |
Langkah-Langkah Menghitung MPN
Langkah 1: Persiapan Sampel
Langkah pertama dalam menghitung MPN adalah persiapan sampel. Ambil sampel yang ingin kamu uji dan kocok dengan baik untuk memastikan distribusi yang merata. Ambil sejumlah sampel yang sesuai dengan volume pipet yang akan digunakan. Misalnya, jika kamu akan menggunakan pipet dengan volume 10 ml, ambil 10 ml sampel.
Langkah 2: Pembuatan Larutan Seri
Setelah sampel selesai dipersiapkan, hal berikutnya yang harus kamu lakukan adalah membuat larutan seri. Dalam penghitungan MPN, kamu perlu membuat tiga larutan seri dengan konsentrasi semakin kecil.
Langkah-langkah membuat larutan seri adalah sebagai berikut:
- Ambil tiga tabung Durham dan tandai dengan angka 1, 2, dan 3.
- Ambil 9 ml larutan seri 10 dan masukkan ke dalam tabung nomor 1.
- Ambil 1 ml sampel dan campur dengan larutan seri 10 di dalam tabung nomor 1. Campur dengan baik.
- Transfer 1 ml campuran sampel dan larutan seri 10 dari tabung nomor 1 ke tabung nomor 2. Campur dengan baik.
- Transfer 1 ml campuran dari tabung nomor 2 ke tabung nomor 3. Campur dengan baik.
- Discard 1 ml campuran dari tabung nomor 3.
Sekarang, kamu memiliki tiga tabung dengan konsentrasi sampel yang semakin kecil.
Langkah 3: Inokulasi Media Pertumbuhan
Setelah membuat larutan seri, langkah berikutnya adalah mengeluarkan media pertumbuhan ke dalam tabung Durham yang sudah berisi larutan seri. Ambil media pertumbuhan yang sesuai dengan bakteri yang akan kamu uji. Misalnya, jika kamu ingin menghitung jumlah E. coli dalam sampel, gunakan media MacConkey.
Langkah-langkah menginokulasi media pertumbuhan adalah sebagai berikut:
- Isi tabung Durham dengan media pertumbuhan sekitar 2/3 bagian.
- Masukkan tabung Durham yang sudah berisi media pertumbuhan ke dalam tiang reaksi.
- Inokulasi tabung Durham dengan konsentrasi tertinggi (tabung nomor 1).
- Inokulasi tabung Durham dengan konsentrasi menengah (tabung nomor 2).
- Inokulasi tabung Durham dengan konsentrasi terendah (tabung nomor 3).
Langkah 4: Inkubasi
Setelah selesai menginokulasi media pertumbuhan, langkah selanjutnya adalah menempatkan tabung Durham di dalam inkubator. Inkubasi dilakukan pada suhu dan waktu yang sesuai dengan bakteri yang kamu uji. Misalnya, jika kamu menguji E. coli, inkubasi dilakukan pada suhu 37 derajat Celsius selama 24 jam.
Langkah 5: Interpretasi Hasil
Setelah inkubasi selesai, kamu dapat menginterpretasikan hasil. Hasil MPN ditentukan berdasarkan jumlah tabung yang menunjukkan pertumbuhan bakteri. Jumlah MPN dihitung dengan menggunakan tabel MPN yang disesuaikan dengan volume sampel dan jumlah tabung yang menunjukkan pertumbuhan bakteri.
FAQ tentang MPN
1. Apa itu MPN?
MPN adalah singkatan dari Most Probable Number atau jumlah paling mungkin. MPN digunakan untuk menghitung jumlah bakteri atau mikroorganisme lain dalam sampel.
2. Apa yang Diperlukan untuk Menghitung MPN?
Untuk menghitung MPN, kamu memerlukan alat dan bahan seperti tabung Durham, larutan seri, media pertumbuhan, pipet, dan inkubator.
3. Bagaimana Langkah-Langkah Menghitung MPN?
Langkah-langkah menghitung MPN meliputi persiapan sampel, pembuatan larutan seri, inokulasi media pertumbuhan, inkubasi, dan interpretasi hasil.
4. Apa yang Dimaksud dengan Tabung Durham?
Tabung Durham adalah tabung khusus yang digunakan untuk menangkap gas yang dihasilkan oleh bakteri selama pertumbuhan. Tabung Durham memiliki bentuk bulat dan leher yang sempit, dan biasanya terbuat dari kaca atau plastik.
5. Apa yang Dimaksud dengan Larutan Seri?
Larutan seri adalah campuran dari sampel dengan larutan pengenceran yang semakin kecil. Dalam penghitungan MPN, tiga larutan seri dengan konsentrasi semakin kecil dibuat dari sampel awal untuk memperkecil konsentrasi sampel.