Prinsip Spektrofotometri UV Vis

admin 29 April 2023pendidikan58 Views

Spektrofotometri UV Vis adalah teknik analisis kuantitatif yang digunakan untuk menentukan konsentrasi suatu senyawa dalam suatu larutan. Teknik spektrofotometri ini menggunakan sinar ultraviolet dan sinar tampak yang dipancarkan oleh suatu sumber cahaya untuk mengukur absorbansi suatu sampel.

Daftar Isi tampilkan

Prinsip Dasar Spektrofotometri UV Vis

Prinsip dasar spektrofotometri UV Vis berdasarkan pada hukum Beer-Lambert. Hukum ini menyatakan bahwa jumlah cahaya yang diserap oleh suatu senyawa dalam suatu larutan berbanding lurus dengan konsentrasi senyawa tersebut dan ketebalan larutan tersebut.

Rumus hukum Beer-Lambert adalah sebagai berikut:

A = εcl

Dimana:

A = absorbansi

ε = koefisien absorpsi molar

c = konsentrasi senyawa dalam larutan

l = panjang jalan optik

Dengan menggunakan rumus ini, kita dapat mengukur konsentrasi suatu senyawa dalam suatu larutan dengan mengukur absorbansi sampel menggunakan spektrofotometer UV Vis.

Prosedur Spektrofotometri UV Vis

Prosedur spektrofotometri UV Vis umumnya terdiri dari beberapa langkah, yaitu:

1. Persiapan sampel: Sampel yang akan diukur harus dipersiapkan terlebih dahulu sesuai dengan metode yang digunakan. Biasanya sampel diencerkan atau diambil bagian tertentu dari larutan untuk diukur.

2. Kalibrasi spektrofotometer: Spektrofotometer perlu dikalibrasi terlebih dahulu menggunakan larutan standar dengan konsentrasi yang diketahui. Hal ini dilakukan untuk memastikan bahwa spektrofotometer mengukur absorbansi secara akurat.

3. Pengukuran absorbansi sampel: Sampel yang sudah dipersiapkan kemudian diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer. Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang tertentu sesuai dengan karakteristik senyawa yang akan diukur.

4. Perhitungan konsentrasi: Konsentrasi senyawa dalam sampel dihitung menggunakan rumus Beer-Lambert dan absorbansi yang diukur tadi.

Aplikasi Spektrofotometri UV Vis

Spektrofotometri UV Vis banyak digunakan dalam berbagai bidang, seperti:

1. Kimia: Spektrofotometri UV Vis digunakan untuk mengukur konsentrasi senyawa dalam suatu larutan, misalnya dalam analisis kualitatif dan kuantitatif.

2. Farmasi: Spektrofotometri UV Vis digunakan untuk mengukur konsentrasi obat dalam suatu larutan dan menentukan kadar suatu senyawa aktif dalam obat.

3. Biologi: Spektrofotometri UV Vis digunakan untuk mengukur konsentrasi protein dalam suatu sampel, misalnya dalam analisis protein.

Kelebihan dan Kekurangan Spektrofotometri UV Vis

Spektrofotometri UV Vis memiliki kelebihan dan kekurangan sebagai berikut:

Kelebihan:

1. Mudah digunakan: Spektrofotometer UV Vis mudah digunakan dan hasil pengukuran dapat diperoleh secara cepat.

2. Akurasi yang tinggi: Spektrofotometri UV Vis memiliki akurasi yang tinggi dalam mengukur konsentrasi senyawa dalam suatu larutan.

Kekurangan:

1. Hanya dapat mengukur senyawa yang dapat menyerap sinar UV atau tampak: Spektrofotometri UV Vis hanya dapat mengukur senyawa yang memiliki gugus kromofor atau konsentrasi senyawa yang cukup tinggi untuk menyerap sinar UV atau tampak.

2. Tidak dapat mengukur senyawa yang berada dalam fase padat: Spektrofotometri UV Vis tidak dapat mengukur konsentrasi senyawa yang berada dalam fase padat seperti padatan atau kristal.

Kesimpulan

Spektrofotometri UV Vis adalah teknik analisis kuantitatif yang digunakan untuk menentukan konsentrasi suatu senyawa dalam suatu larutan. Prinsip dasar spektrofotometri UV Vis berdasarkan pada hukum Beer-Lambert. Prosedur spektrofotometri UV Vis terdiri dari beberapa langkah, yaitu persiapan sampel, kalibrasi spektrofotometer, pengukuran absorbansi sampel, dan perhitungan konsentrasi. Spektrofotometri UV Vis banyak digunakan dalam berbagai bidang seperti kimia, farmasi, dan biologi. Spektrofotometri UV Vis memiliki kelebihan dan kekurangan seperti mudah digunakan dan akurasi yang tinggi, namun hanya dapat mengukur senyawa yang dapat menyerap sinar UV atau tampak dan tidak dapat mengukur senyawa yang berada dalam fase padat.